Орталық жүйке жүйесінің инфекциясын диагностикалау 2 бөлігі

Орталық жүйке жүйесі немесе ОЖЖ инфекциясы ерте диагностикаланбаса және емделмесе, өмірге қауіп төндіруі мүмкін. ОЖЖ инфекциясы спецификалық емес болғандықтан, дәл диагнозды анықтау қиынға соғуы мүмкін. Нуклеин қышқылын in vitro күшейтуге негізделген молекулалық әдістер күнделікті микробтық диагностика үшін қолдана бастайды. Бұл молекулалық әдістер әдеттегі диагностикалық әдістерден гөрі сезімталдығы мен ерекшелігі жоғарылап жетілдірілді. Сонымен қатар, цереброспинальды сұйықтық сынамаларында қолданылатын молекулалық әдістер қоздырғыштар тудыратын ОЖЖ инфекциясын диагностикалаудың жаңа стандарты болып саналады.

ОЖЖ инфекциясын диагностикалаудың молекулалық әдістері денсаулық сақтаудың бірнеше түрін диагностикалау үшін әр түрлі моноплексті және мультиплексті ПТР талдаулар ұсынады. Pan-omic молекулалық платформалар ОЖЖ инфекциясын диагностикалауға да көмектеседі. ОЖЖ инфекциясын диагностикалау үшін молекулалық әдістер қолданылғанымен, осы диагностикалық әдістердің нәтижелерін денсаулық сақтау мамандары мұқият анықтауы керек. Келесі мақалада орталық жүйке жүйесінің инфекциясын диагностикалау үшін қолданылатын әдеттегі диагностикалық әдістер мен молекулалық әдістер, оларды қолдану және болашақтағы тәсілдер туралы айтылады.

ОЖЖ инфекциясын диагностикалаудағы молекулалық әдістер

Нуклеин қышқылы сезімталдығы мен ерекшелігінің жоғарылауына байланысты in vitro күшейтуге негізделген молекулалық әдістер ақылға қонымды және тиімді уақыт кезеңінде ОЖЖ инфекциясын диагностикалау мүмкіндігін едәуір жақсартты. ПТР-ден алынған бірнеше әдістер, сайып келгенде, қазіргі кездегі диагностикалық әдістердің икемділігі мен қаттылығын арттырды.

РНҚ мақсаттарын арттыру үшін кері транскриптаза немесе RT, -PCR жасалды. Оны қолдану РНҚ-вирустық инфекциялардың диагностикасында және олардың емге реакциясын басқаруда маңызды рөл атқарады. Энтеровирустың RT-PCR нәтижесі бойынша шараларға уақтылы қол жеткізу ауруханада болудың қысқа болуын, антибиотиктің қажетсіз қолданылуын және көмекші зертханалық зерттеулер мен сынақтардың төмендеуін көрсетті. ГСО-да бактериялық қоздырғыштар мен герпес вирустарын диагностикалау үшін гендердің сақталған аймақтарына бағытталған бір жұп праймерді қолданатын кең ауқымды рРНК ПТР әдістері қолданылды. Изотермиялық күшейтуге негізделген әдістер. оның ішінде цикл арқылы жүзеге асырылатын изотермиялық күшейту немесе LAMP бірнеше минуттан бірнеше сағатқа дейінгі диагнозды ұсыну үшін жасалған. 2-кестеде АҚШ-тың Азық-түлік және дәрі-дәрмек басқармасы немесе FDA арқылы CSF ішіндегі микробтардың қоздырғыштарын диагностикалау үшін тазартылған коммерциялық in vitro диагностикалық құрылғылар немесе IVD көрсетілген.

Monoplex сараптамалары

Кәдімгі молекулалық әдіс үш фазаны қамтиды: үлгіні алу, мақсатты нуклеин қышқылын күшейту және ампликонды анықтау. ОЖЖ инфекциясын диагностикалау үшін сәтті қолданылған алғашқы молекулалық талдаулардың бірі цереброспинальды сұйықтықта немесе БЖЖ-да HSV диагностикасы үшін қолданылған. Зерттеулер көрсеткендей, ПСР HSV энцефалиті менингитін диагностикалау үшін ми тінінің дақылына ұқсас екенін көрсеткен кезде ПТР таңдау сынағы болды. Герпес пен энтеровирусты диагностикалауға арналған ПТР-ге негізделген көптеген әдістер вирустық культурамен салыстырғанда сезімталдықтың жоғарылауымен қол жетімді болды.

Нуклеин қышқылын күшейтетін және ампликонды анықтайтын нақты уақыттағы ПТР клиникалық зертханаларда молекулалық әдістерге көшуді одан әрі жақсартты. Кәдімгі ПТР-ден айырмашылығы, нақты уақыт жүйесі «жабық» жүйе болып табылады және ол ластаудың негізгі проблемасын шешеді. Қолжазбаны дайындау кезінде CSF ішіндегі HSV және энтеровирустарды диагностикалауға көмектесетін үш молекулалық талдау, сайып келгенде, алдыңғы мақаланың 2-кестесінде көрсетілгендей FDA мақұлдады. Нақты уақыттағы ПТР негізіндегі әдістер - бұл 1947 жылы Угандада алғаш рет тіркелген Зика вирусын диагностикалауға көмектесетін негізгі диагностикалық әдіс, және қазіргі уақытта вирус Бразилия мен Орталық Америкада кең таралғаннан кейін бүкіл әлемде алаңдаушылық тудырып отыр. Зерттеулер барысында адам сарысуындағы Зика вирусын диагностикалау үшін 7.7pfu / реакциясы шектеулі болған кезде бір сатылы RT-PCR анализі жасалды. Плазмамен қатар Зика вирусының РНҚ-сы несеп пен плазма арқылы диагнозды симптомдар пайда болғаннан кейінгі алғашқы 2 апта ішінде анықтауға болады. 2016 жылғы наурызда FDA сарысудағы, зәрдегі, CSF пен амниотикалық сұйықтықтағы Зика, Чикунгуня және Денге вирустарын бір мезгілде диагностикалау үшін шұғыл қолдануға авторизацияланған триоплекс-ПТР талдауын мақұлдады. RT-PCR талдауы LOD 1.54 10 4 GCE / мл сарысудағы Зика вирусымен қосарланған гидролиз зондтарын қолданады.

Нақты уақыттағы ПТР негізіндегі диагностикалық талдауларды енгізу бірнеше бактериялық инфекциялардың ерте және тиімді диагностикасына әсер етті. Изотермиялық күшейтуге негізделген молекулалық талдаулар өте жақсы жұмыс сипаттамаларына ие және олар арнайы жабдықты қажет етпейді. Бұл талдаулар медициналық көмекке жақын немесе жақын жерде тестілеуді қолдану үшін маңызды болып табылады. LAMP негізіндегі әдістер CSF-те Neisseria менингитін, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae b типін, M. tuberculosis және JEV диагностикасын жүргізу үшін қолданылды. Xpert MTB / RIF талдауы туберкулездің реттелуін ПОК-да немесе медициналық көмек жағдайында жедел клиникалық шешім қабылдауға мүмкіндік беретін интеграцияланған және автоматтандырылған жүйені ұсыну арқылы айтарлықтай жақсартты. Бірнеше ғылыми зерттеулер Xpert MTB / RIF-ті туберкулездің CSF ішіндегі туберкулездің туберкулездің диагнозын бағалау үшін қолданды. Он үш зерттеудің мета-анализінде Xpert талдауының жиынтық сезімталдығы 80.5 пайызды немесе 95 пайыз CI 59.0 пайыздан 92.2 пайызға дейін, мәдениетке қарсы 62.8 пайызды, немесе 95 пайыз CI 47.7 пайыздан 75.8 пайызға дейін, композиттік стандартқа сәйкес келді. . CSF-ті сынау үшін кем дегенде 8 of10 мл көлеміндегі үлгінің үлкен мөлшерін пайдалану қажет және центрифугалау өнімділігі айтарлықтай жақсаруы мүмкін. Үлгілерді өңдеуге арналған стандарттаудың жоқтығына қарамастан, ДДҰ CSF-ді әдеттегі микроскопия бойынша бірінші кезектегі сынақ ретінде автоматтандырылған Xpert MTB / RIF талдауымен тексеруге рұқсат берді.

Мультиплексті талдау

Қарапайымдылық мультиплексті молекулалық талдауларды микробтық нысандар тақтасының диагностикасы үшін негіздейді. Менингиттің ең көп таралған себептерін анықтайтын CSF ішіндегі бактериялық патогендерді диагностикалау үшін бірнеше мультиплексті ПТР талдаулары жасалған: S. pneumoniae, N. meningitis, H. influenzae, L. monocytogenes, S. agalactiae, S. aureus, E. coli және M. pneumoniae. Мультиплексті ПТР, содан кейін Luminex суспензия массиві CSF ішіндегі сегіз бактериялық және вирустық қоздырғыштарды диагностикалай алады, соның ішінде N. meningitis, S. pueumoniae, E. coli, S. aureus, L. monocytogenes, S. agalactiae, HSV-1/2, және VZV, басқалармен қатар.

ОЖЖ инфекциясына қатысатын қоздырғыштардың алуан түрлілігін ескере отырып, көптеген бактериялық және вирустық нысандары бар молекулалық панельдерді қолдану диагноздың тиімділігін арттырды. BioFire FilmArray Менингит / Энцефалит панелі қазіргі уақытта алты бактериалды диагностикалау үшін қолданылатын FDA тазартылған мультиплексті талдау болып табылады, мысалы, ішек таяқшасы K1, Haemophilus influenzae, Listeria monocytogenes, Neisseria meningitides, Streptococcus agalactiae and Streptococcus virusgalusia, , энтеровирус, HSV-1, HSV-2, адамның герпесвирусы 6 немесе HHV-6, адамның пареховирусы және VZV, сондай-ақ бір саңырауқұлақ, мысалы, Cryptococcus neoformans / gattii, CSF-тегі мақсат. 2-кестеде көрсетілгендей. Жүйе бір сағатқа созылады, тек 2 минуттық жұмыс уақыты. Қолжазбаны дайындау кезінде екі зерттеу зерттеуі осы талдаудың өнімділігін көрсетті. Менингиттің күдікті жағдайларынан алынған грамдық дақтардан алынған CSF теріс үлгілерінен 48 сынама қолдану арқылы жүргізілген зерттеулер бұл жүйеде EBV сияқты вирустық қоздырғыштардың көп диагноз қойғанын көрсетті. WNV-нің төрт жағдайы және Гистоплазманың бір жағдайы осы талдаумен диагноз қойылмаған. Угандадағы АИТВ жұқтырған науқастардың арасында тесттің нәтижесі криптококк диагнозына сезімталдығы мен ерекшелігінің жоғарылағанын көрсетті. FilmArray Менингит / Энцефалит панелі ОЖЖ инфекциясының жылдам диагнозын ұсынғанымен, оның әртүрлі нысандарға және басқа да қауіпті популяцияларға арналған өнімділігін анықтау үшін қосымша зерттеулер жүргізу қажет.

Қосарлы инфекциялар иммунитеті төмен пациенттер арасында жиі кездеседі және клиниктерге диагноз қою қиынға соғуы мүмкін. Мультиплексті дизайн бір мақсаттағы бірнеше мақсатты бір уақытта диагностикалауға мүмкіндік береді. Бір зерттеу барысында Угандада ВИЧ індетін жұқтырған ересектер арасындағы менингит этиологиясын жан-жақты бағалау үшін перспективалық когортты зерттеу жүргізу үшін моноплексті және мультиплексті молекулалық талдаулар тақтасы қолданылды. Менингитпен ауыратын 314 АҚТҚ жұқтырған науқастардың арасында EBV бірлескен инфекциясы Криптококк, М. туберкулез немесе басқа вирустық қоздырғыштармен диагноз қойылды. Осы жағдайларда CSF ішіндегі EBV толық түсінілмеген, дегенмен бір зерттеу зерттеуі бактериалды менингит және EBV ко-инфекциясы / реактивациясы бар науқастарда нәтиженің нашарлығының белгісі ретінде EBV вирустық жүктемесін жоғарылатумен байланысты.

Пан-омикалық молекулалық талдау

Метагеномиялық терең реттіліктің технологиялық жетілдірілуі оны ОЖЖ инфекцияларының клиникалық диагностикасында қолдануды арттырды. Бірқатар ғылыми-зерттеу жұмыстары дәстүрлі зертханалық тестілеудің шекарасын анықтайтын диагностикалық техниканы шеше алатындығын көрсетті. Стерильді мәртебе мен BBB қорғанысына байланысты, CSF және мидың биопсиялары патогенді диагностикалау үшін осы технологияны одан әрі зерттеу үшін маңызды болып табылады. Метагеномика 14 жастағы жасөспірімде ауыр иммундық жетіспеушілікпен ауыратын, сонымен қатар температураның, бас ауруы мен команың қайталанатын шабуылдарымен ауыратын нейролептоспироз диагнозын қою үшін сәтті қолданылды. Сол сияқты, энцефалопатиямен ауыратын 18 айлық баладан ми биопсиясында жүргізілген жоғары өткізгішті РНҚ секвенциясы жаңа астровирусты анықтады. Жұқпалы ауруларды диагностикалау үшін метагеномиканы қолданғанымен, диагностикалық тестілеудің бұл формасы жалпыға ортақ болып, медициналық көмектің клиникалық стандартына айналғанға дейін көптеген технологиялық және практикалық мәселелерді шешуге тура келеді.

Басқа перспективалық жетістіктер транскриптомикада, протеомикада және метаболомикада болды. Хост және микробтық микроРНҚ немесе миРНҚ, профильдер әртүрлі қабыну және инфекциялық ауруларға қолданылады. Екі miRNA, miR-155 және miRNA-29b, JEV инфекциясының әлеуетті биомаркерлері және анти-JEV терапиясының емдеу мақсаттары ретінде хабарланды. Эксидті нервтік эпидермистің өсу факторы, соның ішінде 2 және CSF-тегі аполипопротеин В, туберкулезді менингитті 83.3 пайыздан 89.3 пайызға дейін және 75 пайыздан 92 пайызға дейінгі сезімталдықпен анықтай алды. CSF метаболиттерін профилдеу ВИЧ-инфекциясы бар науқастарда ОЖЖ жұқпаларын жіктеуде, диагностикада, эпидемиологияда және емдеуді бағалауда пайдалы деп хабарланды. CSF метаболикалық профилін талдау АИВ-жұқтырған науқастардың ауысымының реттелуіне биоэнергетикалық бейімделуді көрсетті.

Аурулармен байланысты нәтиже шаралары

ОЖЖ инфекциясы бар науқастарда этиологиялық агент диагностикасы ең көп таралған қоздырғыштарды, диагностиканың әдістері мен осы агенттерге арналған молекулалық әдістерді, сондай-ақ бағалау және тестілеу үшін ең жоғары өнімді клиникалық үлгілерді қарастыруды қажет етеді. Эпидемиологияны білу және нақты агенттердің клиникалық көрінісі пациенттер үшін қандай диагностикалық әдістерді таңдаған кезде маңызды. Жануарлардың немесе векторлардың экспозициясы, географиялық орны, саяхат тарихы, жылдың маусымы, науқастардың байланысы және кәсіптік экспозициялар ескерілуі керек.

Сәйкес патогенді-молекулалық диагностикалық әдістерді таңдағанда келесі факторларды ескеру қажет. CSF - менингит немесе менингоэнцефалитпен ауыратын науқастар үшін ПТР тестілеудің оңтайлы үлгісі. Жанама дәлелдемелерді басқа үлгі түрлерін сынау арқылы анықтауға болатынымен, емдеу кірістілікке зиян келтірмес бұрын ОЖЖ үлгілерін алуға тырысу керек. Симптомдардың көрінуінен тестілеу уақыты жалған теріс нәтижелерді түсіну және болдырмау үшін маңызды және белгілі бір уақыт аралығында қайта тестілеуге кеңес береді. Мысалы, HSV ПТР жалған теріс нәтиже беруі мүмкін, егер CSF үлгісі HSE инфекциясы процесінде өте ерте немесе кеш алынған болса. Хосттың денсаулығы тестілеудің сипаттамаларына әсер ететіні белгілі. Иммунитеті әлсіреген науқастар HHV-6, JC вирусы, сүйек кемігін трансплантациялаушылар мен токсиоплазма энцефалиті жолымен және ВИЧ-инфекциясы бар пациенттердің әр түрлі шартты патогенділерімен инфекция қаупіне ұшырайды. Көбінесе, инфекция WNV сияқты ауыр болуы мүмкін және осы популяцияда диагноз қою қиын. Төмендегі 3-кестеде ОЖЖ инфекцияларын диагностикалауға арналған молекулалық тесттің қолданылуы мен қиындықтары туралы практикалық ұсыныстар көрсетілген.

Сонымен қатар, оң нуклеин қышқылын күшейту тестілеуінің нәтижелері кейбір вирустардың макрофагтарда немесе неврологиялық тіндерде жасырын түрде тіршілік етуіне байланысты, егер олар кездейсоқ диагноз қойылса да, сезімтал молекулярлық әдістермен нақты патогендік рөлі жоқ, бұл артық емдеуге әкелуі мүмкін. Зерттеулер барысында бұл кемшілікті жою үшін белсенді репликацияны анықтауға көмектесетін қосымша биомаркерлерді қолдану зерттелуде.

Тарихи тұрғыдан алғанда, ОЖЖ инфекциясы бар науқастардың микробиологиялық агенттерін диагностикалауға вирустық және жылдам бактериялы организмдер үшін CSF дақылының төмен өнімділігі, организмге тән антиденелердің ОЖЖ түзілуінің кешеуілдеуі және тестілеу үшін оңтайлы үлгілерді анықтаудағы қиындықтар кедергі болды. Нуклеин қышқылы in vitro күшейтуге негізделген молекулалық диагностика әдістері мен әдістері клиникалық микробиология практикасында кеңірек және жақсы қолданылады. Моноплексті талдау жедел, кездейсоқ қол жетімділігі төмен, өнімділігі төмен талдау үшін қолданылатын негізгі платформа болуы мүмкін. Мультиплексті анализдер бірнеше мақсатты және аралас инфекцияларды диагностикалаудың қосымша пайдасына ие. Алынған CSF үлгісінің көлемі жиі аз болғандықтан, мультиплексті анализдер сынаманың аз мөлшерімен жан-жақты диагностикалық талдау жүргізуге мүмкіндік береді, бұл белдік пункцияларды қайталау қажеттілігінен арылтады. Бір мезгілде көп патогенді диагностикалау стратегиясының клиникалық маңыздылығы мен экономикалық тиімділігі әрі қарайғы зерттеулерді қажет етеді. ОЖЖ инфекциясын диагностикалау кезінде пан-омик техникасын қолдану жаңа қызықты шекара болып табылады, технология болашаққа үміт артады, бірақ жоспарлы нұсқаулардың болмауы және клиникалық жағдайда бейімделу сияқты әртүрлі қиындықтарға байланысты жоспарлы енгізу баяу болады деп күтілуде, дегенмен нәтиже шаралары болашағы зор.

Жоғарыда айтылғандай, орталық жүйке жүйесі немесе ОЖЖ, егер олар дұрыс диагноз қойылмаса және дұрыс емделмесе, өмірге қауіп төндіреді. Алайда, CNS инфекциясы диагнозын анықтау көптеген клиниктерге қиын болуы мүмкін. Бақытымызға орай, диагностиканың әртүрлі әдістері мен молекулалық әдістер сайып келгенде CNS инфекцияларының көзін және денсаулыққа қатысты басқа мәселелерді анықтауға көмектеседі. Осы диагностикалық әдістер мен молекулалық әдістер бұрын айтылғанындай бірнеше жылдар ішінде едәуір жақсарды және осы бағалаудың көпшілігі клиникалық жағдайларда дұрыс емдеу үшін CNS инфекциясын дәл диагностикалау үшін қолданылады. - Доктор Алекс Хименес DC, CCST Insight

Біздің «Орталық жүйке жүйесінің инфекциясын диагностикалау» мақаласының 2 бөлімінде біз CNS инфекцияларының диагностикасында қолданылатын молекулалық әдістер мен панмикалды молекулалық талдаулар, сондай-ақ тестілеу нәтижелерінің нақты нәтижелері клиникамен қалай байланысты екенін қарастырдық. аурулар және денсаулық мәселелері. Біздің ақпаратымыздың шеңбері хиропрактика, тірек-қимыл және жүйке денсаулығына қатысты мәселелермен, сонымен қатар медицина туралы мақалалармен, тақырыптармен және пікірталастармен шектелген. Жоғарыда аталған тақырыпты одан әрі талқылау үшін доктор Алекс Хименеске хабарласыңыз немесе бізбен байланысыңыз 915-850-0900 .

Доктор Алекс Хименес кураторы

Қосымша тақырыпты талқылау: созылмалы ауырсыну

Кенеттен ауырсыну - бұл мүмкін жарақатты көрсетуге көмектесетін жүйке жүйесінің табиғи жауабы. Мысалы, ауырсыну белгілері зақымдалған аймақтан нервтер мен жұлын арқылы миға өтеді. Ауырсыну әдетте ауыр емес, өйткені жарақат емдейді, алайда созылмалы ауырсыну ауырсынудың орташа түріне қарағанда ерекшеленеді. Созылмалы ауырсынумен, адам ағзасы жарақаттың айыққанына қарамастан, миға ауырсыну сигналдарын жіберуді жалғастырады. Созылмалы ауырсыну бірнеше аптадан бірнеше жылға дейін созылуы мүмкін. Созылмалы ауырсыну науқастың қозғалғыштығына қатты әсер етеді және икемділікті, күш пен төзімділікті төмендетуі мүмкін.

Неврологиялық ауруға арналған нейронды үлкейту плюс

Доктор Алекс Хименес неврологиялық ауруларды бағалауға көмектесу үшін бірқатар сынақтарды қолданады. Нейрондық зумер^TM Плюс дегеніміз - антиденеге антигенді тануды ұсынатын неврологиялық аутоантиденелер жиынтығы. Тербелмелі нейро-зумер^TM Плюс әр түрлі неврологиялық байланысты аурулармен байланысы бар 48 неврологиялық антигенге реактивтілікті бағалауға арналған. Нейронның жанды масштабы^TM Плюс пациенттер мен дәрігерлерге қауіп-қатерді ерте анықтау үшін өмірлік маңызды ресурстармен қамтамасыз ету және дербестендірілген алғашқы профилактикаға күшейту арқылы неврологиялық жағдайларды азайтуға бағытталған.

Метиляцияны қолдау формулалары

XYMOGEN s Эксклюзивті кәсіби формулалар таңдаулы лицензиялық денсаулық сақтау мамандары арқылы қол жетімді. Интернетті сату және XYMOGEN формулаларын дисконттау қатаң тыйым салынады.

Мақтанышпен, Александр Хименес XYMOGEN формулаларын біздің қамқорлығымыздағы науқастарға ғана қол жетімді етеді.

Шұғыл қол жеткізу үшін дәрігерге кеңес беру үшін біздің кеңсемізге хабарласыңыз.

Егер сіз науқас болсаңыз Жарақат медициналық және хиропрактика InКлиника, сіз қоңырау шалу арқылы XYMOGEN туралы біле аласыз 915-850-0900.

Сізге ыңғайлы болу үшін және шолу XYMOGEN өнімдері төмендегі сілтемемен танысыңыз. *XYMOGEN-Каталог -жүктеу

* Жоғарыда аталған XYMOGEN саясатының барлығы қатаң сақталады.